超分辨率显微镜，带你领略生物学更多奥秘

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各种超分辨率显微镜是以不同的方式工作的。以PALM和STORM为例，在特定时刻，只有一小部分荧光标记激发或光活化，使得它们能够高精度地独立定位。让所有荧光标记都经历这个过程，这也就带来了一幅完整的超分辨率图像。2014年诺贝尔化学奖的获得者之一、马普生物物理化学研究所主任Stefan Hell表示：“PALM/STORM系统相对容易搭建，但比较难以应用，因为荧光基团必须具有光活化能力。局限之处在于它们需要检测细胞背景下的单个荧光分子，在可靠性上不及STED。”

STED使用激光脉冲来激发荧光基团，并使用环形的激光来淬灭荧光基团，只留下中间纳米大小的荧光而得到超高分辨率。扫描整个样本，可生成一幅图像。“STED的优势在于它是一种按钮技术，”Hell解释说。“它用起来就像标准的共聚焦荧光显微镜。”它还可以利用一些荧光基团对活细胞进行成像，比如绿色或黄色的荧光蛋白和罗丹明衍生染料。

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