Science丨研究揭示流感病毒复制机器组装和RNA合成机制

正文

请到「今天看啥」查看全文

图 1. 流感病毒RNP结构和工作机制

研究人员首先通过复制子系统重组了流感病毒最短的RNP复合体 （NS片段） ，以减小其柔性，并通过 冷冻电镜 单颗粒分析 （ cryo-electron microscopy single particle analysis ，cryo-EM SPA ） 、螺旋重构 （helical reconstruction） 和局部柔性重构 （local reconstruction and flexible refinement） 方法获得了RNP 中段 双螺旋5.1 Å分辨率的三维 模型 。这一结构确定了流感RNP是一个反向平行的右手双螺旋，并 显示出 连续的RNA密度被包装在双螺旋的小沟内 （图1） ，解决了领域内一个持续十多年的争议性问题。 随后，研究人员通过冷冻电子断层扫描 （cryo-electron tomography，cryo-ET） 和子断层平均 （ subtomogram averaging） 方法对从病毒粒子中提取的天然RNP结构进行研究，在亚纳米分辨率水平揭示了 其 中NP亚基组装和RNA包装的分子细节，再次确证了其反向平行的右手双螺旋构造，并且观察到多种构象状态，暗示着两条链 之 间可以发生反向滑动。

Movie 1. 流感病毒RNP 介 导RNA转录工作过程

此外， 他们 在复制子来源的RNP样品中 捕捉到聚合酶处于末端或中间的 纳米分辨率 结构，分别对应静息状态 （resting state） 和延伸状态 （elongation state） ，发现聚合酶通过RNA连接到 NP-RNA双螺旋 外围，与NP之间形成动态或瞬时的相互作用。当处于延伸状态时，聚合酶 锚 定在双螺旋其中一条链上， 保持 与5 ’ 和3 ’ -RNA末端的相互作用；而另 一条链则从 聚合酶另一侧滑过，瞬时释放RNA模板给聚合酶进行RNA合成 ，从而维持RNP整体双螺旋结构不被破坏

请到「今天看啥」查看全文