正文
实验设计与数据分析
：实验设置重复，并采用最小二乘法回归分析病毒清除率（LRV）与各种材料属性和工艺参数之间的关系 。当 P > 0.05 时，认为某一材料属性或工艺参数对 LRV 没有显著影响 。对于 AEX 步骤，还使用椭圆图进行 LRV 异常值分析（
原文 Table 2，展示评估的材料属性和工艺参数及其在各单元操作中的评估范围
） 。
三、研究结果：关键步骤病毒清除能力强
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低 pH 病毒灭活
：在 pH 3.6 - 3.7、温度 15 - 18°C 的条件下研究了 12 种单克隆抗体对 XMuLV 的灭活情况，这属于相对较差的生产条件（相比目标生产 pH 3.5 和正常生产温度范围） 。分析发现，灭活 pH 值、温度、蛋白质浓度、HCP、DNA 以及单克隆抗体单体和聚集体组成等因素对 LRV 均无显著影响（p > 0.05）（
原文 Fig. 1，展示工艺参数和材料属性对 XMuLV 灭活 LRV 的影响
）。时间进程图显示，所有研究案例中，30 分钟时 XMuLV 的灭活 LRV 均达到 5.33 或更高（
原文 Fig. 2，展示 12 种单克隆抗体 XMuLV 灭活能力随时间的变化
）。这表明在该实验条件下，低 pH 处理对 XMuLV 的灭活效果稳定且可靠。
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阴离子交换色谱
：AEX 步骤在 pH 约 7.4、电导率低于 11 mS/cm 的条件下运行，研究 12 种单克隆抗体对 XMuLV 和 MVM 的去除效果（
原文 Table 3，展示 AEX 在 pH 7.4 时对不同单克隆抗体的病毒去除数据
）。通过椭圆图分析发现 mAb12 的 XMuLV LRV 仅为 0.81，属于异常值。排除 mAb12 后，除蛋白质载量密度（p = 0.0051）和 HCP 载量密度（p = 0.045）外，其他工艺参数和材料属性对 XMuLV LRV 无显著影响 。进一步研究发现，mAb12 的 HCP 含量远超其他单克隆抗体，其 HCP 负载密度也远高于平均值，这是导致其 LRV 较低的原因。当将所有 12 种单克隆抗体的 HCP 负载纳入分析时，HCP 对 LRV 的强烈负面影响更为明显（p < 0.0001）（**插入原文 Fig. 3、Fig. 4 和 Fig. 5，分别展示工艺参数和材料属性对 AEX 去除 XMuLV LRV 的影响、HCP 含量对 XMuLV LRV 的影响以及 HCP 对 AEX 去除 XMuLV LRV 的负面影响**）。研究还发现，只要将蛋白质载量限制在 155 mg/mL 介质或 HCP 限制在 500 ng/mg 抗体（约相当于 HCP 负载限制在≤80 μg/ml 树脂），就能保证 XMuLV LRV 达到 5.35 或更高 。对于 MVM 的去除，AEX 的 LRV 变化较大（0.8 - >5.66），且与 XMuLV 的清除率无明显相关性，不过在 mAb12 高 HCP 情况下，两种病毒的 LRV 都较低。混合模式阴离子交换色谱（MM）作为 AEX 的替代方案进行研究，其最低 LRV 为 5.00 。
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病毒过滤
：以 MVM 为模型病毒进行病毒过滤研究，因为它是小型病毒，其 LRV 可保守估计较大病毒的清除情况。研究发现，评估的所有材料属性和工艺参数对 VFA 或 VFB 的病毒去除能力均无显著影响（
原文 Fig. 6，展示进料材料属性和工艺参数对 MVM 通过病毒过滤去除的影响
）。在所有情况下，MVM 的 LRV 均大于 5.0，说明这两种过滤器的效果相似且稳定。
