主要观点总结
本文介绍了Stunner这款平台在生物开发和制造中的应用，包括蛋白质定量、分子大小和分子量生物物理表征、蛋白质浓度和颗粒大小测定等。Stunner通过高通量、低体积的技术，提供精确的结果，无需稀释、标准品和标记，简化了蛋白质表征过程。
关键观点总结
关键观点1: Stunner平台在生物开发和制造中的关键作用
Stunner通过将UV/Vis与RADLS和MALS相结合，提供了全面的数据，包括蛋白质浓度、分子量、颗粒数、尺寸和多分散性等。它在蛋白质表征方面表现出高通量、低体积的优势，仅使用2µL的样品，就能在不到2分钟内完成测量。
关键观点2: 使用Stunner进行蛋白质表征的方法和结果
通过对比不同标准品和实际样品的测量数据，证明了Stunner在测量准确性方面的优势。同时，使用Stunner获取分子量、颗粒大小等信息的方法也得到了介绍。此外，通过比较不同聚集程度的单克隆抗体样品的测量结果，展示了Stunner在检测聚集程度方面的能力。
关键观点3: Stunner在压力测试中的应用
Stunner的UV/Vis和RADLS技术可以快速了解压力测试过程中样品的情况，通过评估不同采样时间点的聚集情况，为生物制品的开发过程提供有价值的信息。
正文
纳米颗粒标准品的精确尺寸使任何生物制品分析方法的验证都更简单。Stunner的RADLS测量多个角度，因此它可以看到难以探测的大颗粒物。此外，RADLS光学器件可自我优化，自动调整以获得每次测量和采样的最佳光束重叠。这意味着Stunner的RADLS可以提供非常精确的DLS读数，并且可以很容易地从2µL的样品中确定溶液中颗粒的大小。
在Stunner上测量了41nm和202nm的聚苯乙烯NIST
TM
可追溯尺寸标准品，其CV分别为2.9%和2.1%（图2）。当样品PDIs＜0.1时，这是单分散颗粒的特征，意味着溶液中颗粒的数量均匀一致。将41和202 nm尺寸的标准品以20:1的比例混合，可以显示当测量多分散、不均匀的样品时会我们能看到什么：Z平均直径在球体的标称尺寸之间，PDI增加到>0.2。
图
2:
41nm和202nm聚苯乙烯NISTTM可追溯尺寸标准品和20:1标准品混合物的Z平均直径（绿色，左y轴）和多分散指数（PDI；蓝色，右y轴）。误差条表示1个标准偏差
使用累积法分析的R
ADLS
数据，如Z平均直径和PDI，非常适合判断样品颗粒大小是否均匀，以及判断单分散颗粒的大小。然而在研究多分散样品时，仍有许多不足之处。另一方面，正则化分析在观察非均匀粒子分布时更有用。该方法为不均匀样品中的颗粒的尺寸分布提供了最佳拟合。
Stunner稳健的正则化分析给出了20:1混合标准品的高度可重复的粒径分布
(
图3）。来自三次测量的散射光强度分布叠加图（左，绿色）在200 nm处显示出比40 nm高得多的峰值，这仅仅是因为较大的颗粒比较小的颗粒有更强烈地散射光
(
光散射强度随着尺寸的六次方而增加）。来自相同测量的质量分布（中间，蓝色）显示了相反的峰高比，因为较小的颗粒在溶液中颗粒的总质量密度中所占比例较大。由于较小的颗粒比较大的颗粒具有高得多的颗粒浓度，因此数量分布（右侧，紫色）仅在~40nm处显示出单个峰值。
图
3:
41nm和202nm聚苯乙烯NISTTM可追溯尺寸标准品在水中的20:1混合物，三个平行样品的散射光强度分布叠加图（绿色，左）、质量（蓝色，中）和数量（紫色，右）
