正文
2%
罐装盐混合,分装到配有
330
微米过滤器的
28
盎司无菌
WhirlPak
袋中,并用
2%
罐装盐的盐水溶液覆盖,直至所有碎片都浸没。在尽可能挤出空气后,将
WhirlPak
袋容器关闭,方法是至少滚动拉环三次。将装有卷心菜和盐混合物的六个
WhirlPak
袋容器在
22°C
下培养。
3
天后,将
1.75
至
2 mL PBS
中的
LP8826R
添加到一半的容器中,以达到
5 × 10
7
CFU/g
。第
3
天接种
LP8826R
是为了模拟水果和蔬菜发酵中同型发酵乳酸菌从异型发酵乳酸菌到同型发酵乳酸菌的演替。
2.
制备(发酵)卷心菜匀浆用于细菌计数并应用于
Caco-2
单层
取约
10 g
卷心菜(发酵卷心菜或生卷心菜)和
1 mL
盐水,置于无菌
WhirlPak
袋中,用
330 µm
滤膜和橡胶锤进行均质处理。随后,将均质液用
PBS
梯度稀释,接种于含有
25 µg/mL
纳他霉素的
MRS
琼脂上进行细菌总数计数。
为了确定适用于
Caco-2
单层细胞的卷心菜匀浆浓度,在
Caco-2 Transwell
模型中,对一组样品[特别是发酵
7
天后的
LSF
(
3
个样品)和市售酸菜(
1
个样品)]在添加
DMEM
中以
1%
、
10%
或
50%