主要观点总结
文章介绍了SLC35B1的功能与结构解析，该蛋白属于核苷酸糖转运蛋白家族，被研究发现在内质网膜上作为ATP/ADP交换器的作用，对细胞生长至关重要。文章详细描述了其结构特点和转运机制，包括其结合位点的残基和门控螺旋的构象变化，以及腺嘌呤基的疏水识别等。此外，文章还涉及内质网的功能和其他相关研究的引用文献。
关键观点总结
关键观点1: SLC35B1的功能与结构解析
SLC35B1属于核苷酸糖转运蛋白家族，被研究发现在内质网膜上作为ATP/ADP交换器的作用。它通过底物逐步移动完成ATP的转运过程，对细胞生长至关重要。
关键观点2: SLC35B1的结构特点
SLC35B1采用典型的DMT折叠形式，由两个四跨膜螺旋束组成。其结合位点靠近胞质一侧，具有结合ATP和ADP的能力，并表现出独特的底物识别方式。
关键观点3: SLC35B1的转运机制
SLC35B1通过精细调控结合位点残基和门控螺旋的构象变化，实现ATP与ADP的高效转运。其中，对腺嘌呤基的疏水识别为其底物选择性提供了结构基础。
关键观点4: 文章涉及的其他研究内容
文章还介绍了内质网的功能和其他相关研究，包括内质网在免疫球蛋白结合蛋白介导的蛋白折叠和ER相关降解等关键过程的作用，以及内质网腔内的ATP参与糖蛋白的运输和MHC I类分子的加工与转运等。
正文
4
】
。虽然此前在大肠杆菌中过表达
SLC35B1
显示其具备
ATP/ADP
交换能力，但相关的动力学参数尚不充分，且其是否参与转运其他底物仍存在争议。
研究人员通过热变性实验发现，人源
SLC35B1
在
ATP
或
ADP
存在时其热稳定性显著增强，说明该蛋白能够特异性结合这两种核苷酸，而对
AMP
和
UDP-
半乳糖的结合能力较弱。核磁共振实验进一步证实了其结合特异性。将
SLC35B1
重构入人工脂质体后，实验显示该蛋白可高效介导
ATP
与
ADP
的交换转运，且二者之间存在竞争性抑制作用，支持其作为内质网膜上
ATP/ADP
交换器的功能。转运参数方面，
SLC35B1
对
ATP
的亲和力
（
Km
约为
3.4
μ
M
）
和转运速率
（
kcat
约为
12
次
/
分钟）
与内质网微粒体的
ATP
摄取数据一致，且其转运效率远高于
ER
内
ATP
依赖的分子伴侣
BiP
。
CRISPR
-
Cas9
敲除筛选结果表明，
SLC35B1
是维持细胞生长所必需的关键
SLC
转运蛋白之一，凸显了其重要作用。结构研究方面，由于
SLC35B1
分子量较小，研究
人员
开发了专门识别其柔性环区的单克隆抗体，并构建了
Fv
–
MBP
融合标签，成功稳定复合物并获得分辨率约为
3.4 Å
的冷冻电镜结构。该结构显示
SLC35B1
采用典型的
DMT
折叠形式，由两个四跨膜螺旋束组成，其中第
4
跨膜螺旋
（
TM4
）
断裂为
TM4a
和
TM4b
，形成一个朝向胞质侧开放的大腔体，这是
NST
家族首次捕获的此类构象。腔体闭合由
TM1
、
TM4a
和
TM9
的保守极性残基通过氢键稳定。通过突变筛选，研究人员
还
发现
Q113F
突变显著增强了
SLC35B1
的热稳定性和
ATP
结合能力，尽管转运活性略有下降，但该突变体的结构分辨率提高至约
3.0 Å
，使
ATP
模拟物
AMP
–
PNP
在结合位点中的环状构象得以清晰解析。
