颠覆！溶瘤疱疹病毒合成起来……

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的基因组拆分成11个片段，且顺序片段与片段之间含有部分重叠序列， 研究者可以分别同时对11个片段进行相关的修饰和改造， 改造后的质粒共同转入酵母菌中发生重组从而获得完整的HSV-1病毒基因组，再将其转入到 E.coli 宿主细胞中进行DNA扩增，收取DNA转染到哺乳细胞中得到具有感染性质的完整病毒。 这种在酵母中装配基因组的病毒（KOS ^YA ），其复制和感染能力与野生型基本一致。

1. HSV-1基因组的装配设计

选择HSV-1属中的KOS序列——KOS-37 BAC（BAC质粒形式存在的KOS基因组克隆），整个基因组分成11个片段，平均每个片段14 kb。每个片段间都有80个碱基对的重叠区域，为之后的酵母菌装配做准备。7号片段中被修饰上BAC及YCp（酵母着丝粒序列质粒），使其在两者中均能复制。装配好的HSV-1基因组标记为KOS ^YA （KOS yeast assembled） 2. HSV-1片段的TAR克隆

通过TAR克隆与cre-loxp技术结合的方式，将11个片段分离收集，每个片段与TAR克隆载体链接，载体上引入PmeI酶切位点（该位点不会切断HSV-1基因组片段），PCR验证后转入

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