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被基质细胞改变的卵巢癌

exosomes  · 公众号  · 医学  · 2017-07-17 22:41

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Results

· CAF和CAA外泌体拥有较高的miR21的拷贝数。

通过电子微镜 qNano分析证实了外泌体的双层膜特征和大小(图1a,b) 蛋白印迹分析显 示外泌体有标志物 CD63和HSP70,但 是缺乏顺式 -高尔 基体特异性标志物 GM130(图1c)

(图1d)热图显示了从4种卵巢癌、2种正常成纤维细胞NF、3种CAF、2种正常脂肪细胞NA、2种CAA分离的外泌体中小RNA的相对表达量:基质细胞(包括正常和肿瘤相关的成纤维细胞及脂肪细胞)中的 Mature miR-21和 Mature miR-21 5′ super variant含量均比肿瘤细胞高,且CAA中上述两者的拷贝数最高(表1)

miRNA-seq和qRT-PCR检测数据之间存在高度一致性:与卵巢癌细胞相比, 在四种基质细胞类型中 三种miR21变体显示出较高的表达水平;Mature 5'-miR21的表达水平在CAAs和卵巢癌细胞之间具有最大的倍数差异,而前体变体 precursor variant 在CAF和卵巢癌细胞之间具有最大的折叠差异(图1e,f)。


·在基质和肿瘤组织中 miR21的表达水平不同

作者从图a中5种细胞类型的原代细胞分离的RNA进行了qRT-PCR分析。结果表明,CAA和CAF表达的内源性miR21水平明显高于卵巢癌细胞和正常的基质细胞(图2a)







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