正文
（
glycogen synthase kinase 3β
，
GSK3β
）和磷脂酰肌醇
-4,5-
双磷酸
3-
激酶催化亚基
αmRNA
表达水平显著降低，腺苷酸环化酶
mRNA
表达水平显著升高，速效救心丸可显著逆转心肌细胞上述指标
mRNA
表达水平，改善心肌细胞功能
[10]
；速效救心丸可抑制线粒体通透性转换孔的开放，保护线粒体膜功能的完整性，减少细胞色素
C
的释放，降低缺血
/
再灌注对大鼠心肌细胞的凋亡作用
[11]
，也可通过调节磷脂肌醇
3-
激酶（
phosphatidylinositide-3 kinase
，
PI3K
）
/
蛋白激酶
B
（
protein kinase B
，
Akt
）
/GSK3β
通路，抑制低氧诱导的细胞凋亡
[12]
；速效救心丸可抑制急性冠脉综合征患者炎症反应，降低血浆纤维蛋白原水平与血小板聚集率，改善病人血管重建术后的临床症状
[13-14]
。目前速效救心丸改善心肌缺血的作用机制尚不明确，本研究探讨了速效救心丸对心肌缺血大鼠心肌组织中缺血损伤相关调控蛋白表达的影响，为阐明其改善心肌缺血的作用机制提供参考。
1
材料
1.1
动物
SPF
级雄性
Wistar
大鼠
50
只，
6
周龄，体质量（
150
±
10
）
g
，购自湖北省实验动物研究中心，许可证号
SCXK
（鄂）
2015-0018
。动物分笼饲养于湖北大学生命科学学院
SPF
级动物房，
12 h
交替光照，自由饮水摄食，饲养温度（
22
±
2
）
℃
，相对湿度（
65
±
5
）
%
。动物实验经湖北大学伦理委员会批准（批准号
20170601
）。
1.2
药品与试剂
丙硫氧嘧啶（
50 mg/
片，批号
160101
）购自广东华南药业集团有限公司；速效救心丸（
40 mg/
粒，批号
616154
）购自天津中新药业集团股份有限公司；垂体后叶素（
6 U/mL
，批号
160401
）购自南京新百药业有限公司；高脂饲料（含
10%
蛋黄粉、
2%
胆固醇、
10%
猪油、
0.5%
胆酸钠、
0.2%
丙硫氧嘧啶、
77.3%
基础饲料）购自湖北省实验动物研究中心；
RIPA
裂解液（批号
P0013B
）、蛋白酶抑制剂
PMSF
（批号
ST506
）、上样缓冲液（批号
P0015
）、抗体稀释液（批号
010917170306
）、化学发光液（批号
040617170602
）购自上海碧云天生物科技有限公司；蛋白酶抑制剂
Cocktail
（批号
15205300
）、磷酸酶抑制剂（批号
41659200
）购自
Roche
生物科技公司；
BCA
蛋白定量试剂盒（批号
SK258368
）购自美国
ThermoFisher Scientific
公司；苏木素
-
伊红（
HE
）染液（批号
G1005
）购自谷歌生物科技公司；肌酸激酶同工酶（
creatine kinase isoenzyme
，
CK-MB
）、心肌肌钙蛋白
T
（
cardiac
troponin T
，
cTnT
）、心肌肌钙蛋白
I
（
cardiac troponin I
，
cTnI
）、血栓素
B
2
（
thromboxane B
2
，
TXB
2
）、
6-
酮
-
前列环素
F-1α
（
6-ketone-prostacyclineF-1α
，
PGF-1α
）和内皮素
-1
（
endothelin 1
，
ET-1
）血清检测试剂盒（批号为
20170323
）购自南京建成生物科技有限公司；鼠抗小鼠
β-actin
单克隆抗体（批号
SC-47778
）购自
Santa
生物科技公司；兔抗大鼠血管内皮生长因子（
