色谱分析法基础知识

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▪ 分子排阻色谱：依据分子体积大小不同进行分离ln离子交换色谱：不同组分对离子交换树脂的亲和力不同而分离

▪ 亲和色谱：利用生物大分子之间的存在的专一的特殊亲和力进行分离

▪ 毛细管电泳：依据各组分淌度和（或）分配行为的差异进行分离

▪ 手性色谱：用于手性药物的分离分析，可分为三类：手性衍生化试剂法；手性流动相添加剂法；手性固定相拆分法

基本术语

色谱分离过程

色谱法的基本术语

检测色谱分离后组分的响应信号对时间作图得到的曲线称为 色谱图 。

色谱流出曲线

▪ 基线 ：在一定色谱条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的信号的曲线，称为基线，如图中 ot 线。实验条件稳定时，基线是一条平行于横轴的线；基线反映仪器（主要是检测器）的噪声随时间的变化。

▪ 峰高 ：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以 h 表示，如图AB’线。

▪ 区域宽度 ：色谱峰的区域宽度直接与分离效率有关。描述色谱峰宽的方法有三种：标准偏差 σ 、峰宽 W 、半峰宽 W 1/2 。

▪ 标准偏差（ σ ） ： σ 为正态分布曲线上两拐点间距离之半， σ 值的大小表示组分离开色谱柱的分散程度。 σ 值越大，流出的组分越分散，分离效果变差；反之，流出组分集中，分离效果好。

▪ 峰宽 W ：通过色谱峰两侧的拐点作切线，在基线上的截距称为峰宽，或称基线宽度，也可用 W 表示，如图 IJ 的距离。根据正态分布的原理 ，可证得峰宽和标准差的关系是 W =4 σ 。

▪ 半峰宽 W 1/2 ：峰高一半处的峰宽称为半峰宽，如图 GH 的距离。 W 1/2 =2.355 σ ， W =1.699 W 1/2 。

W 1/2、 W 都是由 σ 派生而来的，除用它们衡量柱效外，还用于计算峰面积。半峰宽测量较方便，最为常用。

色谱保留值、相对保留值与保留指数

▪ 保留值

是用来描述样品组分在色谱柱中保留程度的参数，并作为色谱定性的指标。其表示方法有：

▪ 相对保留值

又称分离因子、分配系数比或相对容量因子，即在一定色谱条件下，被测组分的调整保留时间（体积）与标准物的调整保留时间（体积）之比。

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