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零成本大幅提高蛋白质组鉴定能力?暨大研发另类质谱鉴定算法策略

生物通  · 公众号  ·  · 2017-10-23 16:55

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之所以难以研发有效的整合算法,关键原因之一是所有的搜库算法都会产生一定的假阳性率(FDR),而由于长期以来受限于蛋白质组学技术的精度局限,某一细胞内总共有多少种蛋白质一直就没有标准答案,从而难以准确评价各种方法所带来的FDR,只能毛估,这样一来就存在着很大的不确定性。在没有标准答案的情况下,贸然合并多种算法的结果将导致假阳性率的迅速累积,使得最终结果变得很不可靠。


针对这一蛋白质组学界的“老大难”问题,暨南大学翻译组学实验室利用翻译组测序(RNC-seq)数据作为稳态细胞内蛋白质的“标准答案”,并另辟蹊径,提出了蛋白水平上的一种简单有效的多算法结果整合策略,不用做额外的实验,零成本轻松提高蛋白质组鉴定数量,同时有效降低假阳性率。


由于翻译组测序具有远高于蛋白质质谱的灵敏度和准确性,可以基本穷尽细胞中正在合成的蛋白质,因此被作为人类蛋白质组计划的核心支柱之一(Zhong et al., Journal of Proteome Research 2014),可以用作“标准答案”的基准来评价与整合各算法的蛋白质鉴定结果。分析显示,7种主流搜库算法各行其是,只有一半的蛋白质被所有算法鉴定到;与翻译组“标准答案”相比,其假阳性率都高达4-5%,远超过其自身预估的1%。因此,若取各算法的并集将导致假阳性率的进一步累积上升,若取各算法结果的交集将大幅度降低鉴定的蛋白质数量,皆不可取。







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