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“没有使用全基因组测序来寻找脱靶效应的研究人员可能会错过一些关键的突变。要知道,一个核苷酸的变化就可能带来巨大的影响,”该研究的作者之一,哥伦比亚大学医学中心(Columbia University Medical Center)的Stephen Tsang教授说道:“我们相信,科学界有必要了解所有由CRISPR带来的脱靶突变,这包括了单个核苷酸的突变,以及在基因组非编码区的突变。”
▲本文作者之一Stephen Tsang教授认为全基因组测序在评估CRISPR的脱靶效应中应起到重要作用(图片来源:Columbia Ophthalmology)
研究人员指出,这项研究表明sgRNA会在目标序列之外,独立地结合其他基因组位点,带来新的突变,而这一点“令人担忧”。尽管这些接受基因编辑的小鼠目前看来一切正常,但不能排除将来出现问题的可能。
目前,研究人员还不清楚造成这一问题的关键。改善sgRNA的设计也许能规避这一问题,又或许这是sgRNA带来的通病,无法完全避免。无论如何,研究人员相信,进一步改善CRISPR-Cas9的精准度依旧有着必要,并能够回答更多的问题。而在风险未明的当下,在使用CRISPR基因编辑技术,尤其是在临床的应用中,研究人员呼吁,我们需要像全基因组测序这样的全面手段,来完整评估脱靶效应造成的影响。
参考资料:
[1] Unexpected mutations after CRISPR– Cas9 editing in vivo
[2] CRISPR gene editing can cause hundreds of unintended mutatio
来源:学术经纬
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