不同发育时期金银花颜色与活性成分的相关性分析

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2013 年 7 月采自山东中医药大学药用植物园种植的忍冬植株不同发育时期（三青期、二白期、大白期、银花期、金花期、凋花期）的花蕾或花，统一置硅胶盒中干燥，备用。样品经山东中医药大学周凤琴教授鉴定为忍冬科植物忍冬 Lnicera jaoponica Thunb. 的干燥花蕾。

2 方法

2.1 金银花颜色的测定

2.1.1 测定条件 光源 D65 ，标准观察角度 10° ，波长扫描范围 780 ～ 380 nm ，照明口径 Ф 50 mm ，扫描速度 600 nm/min 。数据用 L ^* 、 a ^* 、 b ^* 色空间法表示，其中 L ^* 为亮度值， L ^* 越大亮度越高； a ^* 为红 - 绿色轴， a ^* 值越大越红，越小则越绿； b ^* 为黄 - 蓝色轴， b ^* 值越大越黄，越小则越蓝。

2.1.2 测量方法 取不同发育时期金银花样品，平铺于色彩色差仪测试口处，测定其表面的颜色，随机扫描 10 次，取平均值。花蕾褐变程度用褐变指数（ BI ）表示 ^[5] 。

BI ＝ 100 × ( X － 0.31)/0.17

X ＝ (a ^* ＋ 1.75 L ^* )/(5.645 L ^* ＋ a ^* － 3.012 b ^* )

2.2 金银花活性成分测定 ^[6-7]

2.2.1 色谱条件 色谱柱： ZORBAXSBC ₁₈ （ 250 mm × 4.6 mm ， 5 μm ）；体积流量 1.0 mL/min ；柱温 30 ℃ ；进样量 20 μL ；检测波长 240nm （环烯醚萜类）、 325 nm （酚酸类）、 350 nm （黄酮类）。流动相为乙腈（ A ） -0.1% 甲酸水溶液（ B ），线性梯度洗脱， 0 ～ 10 min ， 8% ～ 10%A ； 10 ～ 20min ， 10% ～ 15%A ； 20 ～ 30min ， 15% A ； 30 ～ 40min ， 15% ～ 25%A ； 40 ～ 60min ， 25% ～ 100%A 。理论板数按绿原酸峰计算应不低于 1 000 。在此条件下，对照品和供试品溶液的色谱图见图 1 、 2 。 12 ～ 14 号峰 3 种成分在金银花 HPLC 色谱图中峰面积很大，根据文献中 ^[9] 环烯醚萜苷类的性质及三者的紫外吸收图谱（图 3 ），确认该色谱峰为环烯醚萜苷类成分。

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