打破争议！Science子刊发表视网膜可再生研究

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单细胞多组学揭示了人胎儿视网膜 CMZ中hNRSC的存在

研究团队在分析人类胎儿视网膜超 30万个细胞时，团队意外捕捉到一群特殊细胞： 人神经视网膜干细胞 (hNRSCs) 。它们高表达 MECOM、RELN等"干性基因"，却与传统视网膜祖细胞存在显著差异。通过跨物种比对，这些神秘细胞的空间定位竟与低等脊椎动物视网膜干细胞栖息地——睫状边缘区（CMZ）高度重叠，这一发现直接挑战了"高等哺乳动物视网膜无再生干细胞"的传统认知。

图 1 人胎儿视网膜 CMZ中两种干细胞亚群及其发育谱系的鉴定

2、 hNRSC位于无色素CMZ中，对视网膜细胞有高度的自我更新和分化潜力

为了进一步研究人类 CMZ中的hNRSC， 研究团队 收集了胎儿 的 视网膜（ n=10，妊娠16至22周）。使用H&E染色，观察到胎儿视网膜CMZ中存在双层结构，一层是与NR连接的非色素CMZ，另一层是色素CMZ。然后，进行免疫荧光染色，以检查与hNRSC和RPE干细胞相关的标记物的空间表达模式。结果显示hNRSC标记物，如MECOM、CPAMD8和COL9A1，主要位于外周NR和非色素CMZ中（图2C）。

图 2 hNRSCs在CMZ中的空间分布和分化潜力

细胞培养的免疫染色同样表明， hNRSC具有分化为主要视网膜细胞类型的能力，包括RPC（PAX6 ⁺ /SOX2 ⁺ ）、 RGC（PAX6 ⁺ /SOX2 ^- or BRN3A ⁺ ）、 HCs/AC（PROX1 ⁺ ）、 PC前体（CRX ⁺ ）、 PCs（NRL ⁺ 或 ARR3 ⁺ ）、 BCs（CHX10 ⁺ ）和 MCs（RLBP1 ⁺ 、 VIM ⁺ 或 SOX9 ⁺ ）。接着进一步研究了 hNRSC在体外的分化。在培养9天后，更明显的是在第21天，它们开始分化为CRX-tdTomato阳性的PC前体，表明 它们具有分化为视网膜细胞的潜力 。

3、CMZ类结构促进hROs的修复

人类视网膜类器官（ hRO s） 可以很好地模拟体内视网膜。在培养过程中，观察到约 80 % 源自人胚胎干细胞（ hESC）的hRO发育出CMZ样结构。与缺乏这种解剖特征的hRO相比， 具有 CMZ样结构的hRO显示出更高的存活率和整体存活率 （ P<0.01）（图3C）。接 着 ，在发育阶段第 75天切除NR后，在CMZ中进行了为期1天的EdU暴露，以标记积极分裂的细胞

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