抗体偶联药物（ADC）的基础理论与研究进展

连接子作为抗体与载荷之间的分子桥梁，其化学性质直接影响 ADC 的药代动力学特征与作用机制。理想的连接子应具备双重特性：在血液循环中保持高度稳定以避免过早释放载荷，到达靶细胞后能通过特定机制（如 pH 响应、酶解作用）精准释放细胞毒性物质。根据释放机制的不同，连接子可分为可裂解型与不可裂解型两大类：腙键、二硫键等可裂解连接子通过化学水解或酶促反应断裂；硫醚键等不可裂解连接子则依赖抗体在溶酶体中的蛋白酶解作用释放载荷 - 抗体片段结合物。这种差异化设计为适应不同治疗场景提供了灵活选择。

细胞毒性载荷的作用本质

ADC 载荷成分通常为强效细胞毒剂或免疫调节剂，其作用强度较传统化疗药物高出 1-3 个数量级，这一特性使得 ADC 能够以极低剂量发挥抗肿瘤效应，同时降低全身毒性。目前临床应用的载荷主要包括微管蛋白抑制剂（如美登素类、奥瑞他汀类）、DNA 损伤剂（如卡利奇霉素、吡咯并苯二氮卓类）及新兴的免疫调节剂（如 TLR 激动剂）。值得注意的是，强效载荷的使用对生产过程中的安全控制提出了严苛要求，需在合成、纯化及制剂环节实施特殊防护措施。

ADC 的质量控制与表征体系

ADC 的开发面临着生物药与化学药双重属性带来的复杂性挑战，其质量控制体系需要整合生物大分子与小分子药物的评价标准，建立覆盖从原料到成品的全生命周期控制策略。

关键质量属性（CQA）的系统评估

ADC 的 CQA 评估需兼顾抗体与载荷的双重特性：在抗体层面，需控制纯度（单体含量、聚集体水平）、电荷异质性（脱酰胺、氧化等翻译后修饰）及抗原结合活性；在载荷 - 连接子层面，需关注残留溶剂、亚硝胺类杂质及降解产物的水平。特别重要的是药物 - 抗体比率（Drug-Antibody Ratio, DAR），这一参数表征每个抗体分子偶联的载荷平均数，直接影响药物的效价与安全性。DAR 的优化需要平衡多个因素：DAR 过低可能导致抗肿瘤活性不足，过高则可能影响抗体的理化性质与药代动力学，理想 DAR 通常在 2-8 之间，具体取决于抗体特性与载荷毒性。

DAR 测定的技术挑战与进展

DAR 的精确测定是 ADC 质量控制的核心难点，其挑战源于 ADC 分子的结构异质性与动态复杂性。目前常用的分析方法包括三大类：HPLC/UV 法通过疏水相互作用色谱（HIC）或反相色谱（RP-HPLC）分离不同 DAR 物种，基于 280nm 处的紫外吸收峰面积比计算 DAR；LC-QTOF/MS 法利用质谱技术直接测定各组分的分子量，实现 DAR 的精准定量；紫外 - 可见分光光度法则通过测定抗体（280nm）与载荷（特定波长）的吸光度比值计算 DAR。近年来，位点特异性偶联技术的发展（如微生物转谷氨酰胺酶介导的偶联、半胱氨酸定点偶联）显著提高了 DAR 的均一性，相应地也推动了分析技术向更高灵敏度与特异性方向发展。

杂质控制的多维策略