正文
NPs
）。研究发现，参与吞噬过程的主要有肝和脾中的巨噬细胞，这就导致
NPs
在这两种组织中聚集，使得
mRNA
在其他组织中的转染变得困难
［
9
］
。
1.2
内体逃逸
当到达靶细胞时，携带
mRNA
的载体通过内吞的方式进入细胞质，这也是最常见的载体进入细胞内部的方式
［
10
］
。内体逃逸是指
mRNA
需要从内体小泡中释放出来，进而跟宿主细胞核糖体结合被翻译成抗原蛋白，抗原蛋白经过修饰后被分泌出细胞从而发挥作用。在内体小泡中，
mRNA
能够被
Toll
样受体（
Toll-like receptors
，
TLRs
）检测到并被送去降解
［
11
］
，所以内体逃逸对于
mRNA
到达核糖体是至关重要的。
1.3
胞内免疫
当外来
mRNA
被递送到细胞质中时，能够被
TLR3
和
TLR7/8
识别，或者通过激活细胞质中的维甲酸诱导基因
Ⅰ
样受体（
RIG-I-like receptors
，
RLRs
）从而激活天然免疫系统
［
12-13
］
。同时，外来的
mRNA
还可以通过激活
TLRs
诱导干扰素（
IFN
）
-α
和
IFN-β
等
Ⅰ
型干扰素等促炎细胞因子的表达
［
14-15
］
。所以，合成的
mRNA
疫苗可以通过激活不同的细胞因子来促进
mRNA
免疫后的细胞或者体液反应，从而作为良好的自佐剂。但是胞内免疫也会限制
mRNA
发挥作用，
TLR
家族中的模式识别受体（
pattern recognitionreceptors
，
PRRs
）、
RLRs
和
NOD
样受体（
NOD-likereceptors
，
NLRs
）能够特异性检测双链
mRNA
（
ssRNA
）或者单链
mRNA
（
dsRNA
），并且能够在它们转化为有治疗作用的蛋白质之前使其降解。
2
脂质载体在
mRNA
疫苗递送中的研究现状
传统的递送
mRNA
疫苗的手段有物理方法和病毒载体方法，电穿孔
［
16
］
和基因枪
［
17
］
是物理手段递送
mRNA
的经典方法，但是临床实验证明物理方法通常对细胞有害，不适合在体内应用
［
18
］
。基于病毒载体递送
mRNA
的方式尽管已经应用于临床治疗，但是仍然存在安全性、稳定性以及有效性等诸多方面的问题，所以更加有效的传递系统亟待开发。脂质及其衍生物凭借其低免疫原性、生物相容性及对
mRNA
较高的包封率成为近年来备受关注的
mRNA
疫苗的新型递送系统。基于脂质载体的递送系统能够包裹
mRNA
分子，包封率较高，保护
mRNA
免受酶降解。另外脂质载体通常会含有对
mRNA
细胞内转运有利的重要的功能性脂质成分
［
19
］
。这些脂质成分在生理环境下带有正电荷，通过静电作用将带有负电荷的
mRNA
分子包裹起来，并帮助整个载体系统与靶细胞的细胞膜相结合，从而起到递送
mRNA
的作用。不仅如此，在内体逃逸过程中，可电离的阳离子脂类与内体膜上的阴离子脂类相互作用，形成破坏性的非双层膜结构，最终将包裹的
mRNA
释放到细胞质中
［
20
］
。目前用于递送
mRNA
疫苗的脂质载体分为
3
大类：脂质体、脂质纳米粒和脂质
-
聚合物纳米粒
［
21-28
］
，见表
1
。组成脂质的材料包括
2-
二油酰基羟丙基
-3-
N
，
N
，
N
-
三甲胺氯（
DOTAP
）、胆固醇（
Chol
）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺
-
聚乙二醇
2000
（
DSPE-PEG
）、二油酰磷脂酰乙醇胺（
DOPE
）、二硬脂酰基磷脂酰胆碱（
DSPC
）、聚
-
（
β-
氨基酯）聚合物（
PBAE
）、
1
，
2-
二油酰
-sn-
甘油
-3-
乙基磷酸胆碱（
EDOPC
）、
1
，
2-
二肉豆蔻酰基
-sn-
甘油基
-3-
磷酸乙醇胺
-
N
-
［甲氧基（聚乙二醇）
-2000
］（
C14-PEG2000
）。
表
1
mRNA
疫苗的基于脂质递送系统示例
Table 1
Example of lipid-based delivery system for mRNAvaccine
|
脂质组成
|
类型
|
疾病
|
mRNA
编码蛋白
|
给药途径
|
|
DOTAP
[21]
|
脂质体
|
结肠癌
|
Survivin-T34A
|
腹腔注射
|
