正文
170711
、
180112
、
171119
）均购自苏州市天灵中药饮片有限公司；乳香（批号
16010500
）购自北京仟草中药饮片有限公司。以上饮片经南京中医药大学药学院刘圣金副教授分别鉴定为姜科植物高良姜
Alpiniaofficinarum
Hance
的干燥根茎、姜科植物姜
Zingiber officinale
Rosc.
的干燥根茎、伞形科植物防风
Saposhnikovia divaricata
(Turcz.) Schischk.
的干燥根、芸香科植物花椒
Zanthoxylum bungeanum
Maxim.
的干燥成熟果皮、木兰科植物八角茴香
Illicium verum
Hook. f.
的干燥成熟果实、伞形科植物茴香
Foeniculum vulgare
Mill.
的干燥成熟果实、胡椒科植物胡椒
Piper nigrum
L.
的干燥成熟果实、樟科植物山鸡椒
Litsea cubeba
(Lour.) Pers.
的干燥成熟果实、芸香科植物吴茱萸
Euodiarutaecarpa
(Juss.)Benth.
的干燥近成熟果实、唇形科植物荆芥
Schizonepetatenuifolia
Briq.
的干燥地上部分、樟科植物肉桂
Cinnamomumcassia
Presl
的干燥树皮、桃金娘科植物丁香
Eugeniacaryophyllata
Thunb.
的干燥花蕾、菊科植物木香
Aucklandia lappa
Decne.
的干燥根、伞形科植物藁本
Ligusticum sinense
Oliv.
的干燥根、橄榄科植物乳香树
Boswellia carterii
Birdw.
树皮渗出的树脂，均符合《中国药典》
2015
年版标准。
1.2
药品与试剂
无水硫酸钠（批号
170328041V
）购自南京化学试剂有限公司；醋酸乙酯（批号
20171102
）购自永华化学科技有限公司。
1.3
仪器
PTHW
型调温电热套（南通市通州申通电热器厂）；
TGL-16B
型高速离心机（上海安亭科学仪器厂）；
BAS-124S
型分析天平、
BT-52S
型分析天平（德国赛多利斯股份有限公司）；
WAY-2S
型阿贝折光仪（上海精密科学仪器有限公司）；
7890A-5975C
型气相色谱质谱联用仪（美国安捷伦公司）；
DHG9123A
型恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）；
HH-4
型恒温水浴锅（国华电器有限公司）。
1.4
数据库与软件
Swiss Target Prediction
网站（
http://new.swiss-targetprediction.ch
）、中药系统药理学数据库与分析平台（
TCMSP
，
http://lsp.nwu.edu.cntcmspsearch.php
）、
TIGER
数据库（
http://bioinfo.wilmer.jhu.edu/tiger
）、
Uniprot
数据库（
http://www.uniprot.org
）、京都基因与基因组百科全书（
Kyoto encyclopedia of genes and genomes
，
KEGG
）通路数据库（
http://www.genome.jp/kegg
）、
STRING
数据库（
http://string-db. org
）、
DAVID
数据库（
https://david.ncifcrf.gov/home.jsp
）、
PubChem
数据库（
https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
）、
Cytoscape3.7.0
软件。
2
方法
2.1
辛热
、
辛温中药挥发油的制备
称取适量中药饮片，粉碎后加入圆底烧瓶中，加入
10
～
15
倍体积的蒸馏水，连接挥发油提取器、冷凝管，自冷凝管上端加蒸馏水至溢出挥发油提取器支口，浸泡
0.5
～
1.0 h
，加热保持微沸至挥发油体积无明显变化，停止加热。室温冷却，用棕色玻璃瓶接收挥发油，加入适量无水硫酸钠脱水，于
4
℃避光密封保存备用
[1]
。
2.2
基于气相色谱
-
质谱
（
gas chromatography- massspectrometry
，
GC-MS
）
联用技术的中药挥发油成分分析
2.2.1
供试品的制备
精密称定中药挥发油
0.10 g
于
10 mL
量瓶中，用醋酸乙酯定容。
12 000 r/min
离心
10 min
，取上清液进样分析。
2.2.2
GC-MS
条件
HP-5ms
色谱柱（
5%
苯甲基聚硅氧烷石英毛细管柱，
30 m
×
0.25 mm
×
0.25 μm
）；载气为氦气；体积流量为
1 mL/min
；
EI
离子源；电离能量为
70 eV
；离子源温度为
230
℃；进样口温度为
250
℃；进样体积为
1 μL
；分流进样，分流比
50
∶
1
（木香油与肉桂油的分流比为
40
∶
1
）
[1]
。
2.3
辛热
中药挥发油中倍半萜类成分与靶点网络及蛋白质
-
蛋白质互作
（
protein-protein interaction
，
PPI
）
网络的构建
选取
5
种辛热中药挥发油（高良姜油、肉桂油、胡椒油、吴茱萸油、干姜油）中倍半萜类成分，基于
TCMSP
和
Swiss TargetPrediction
数据库进行潜在活性成分及靶点筛选，用
Uniprot
数据库进行基因名校正。课题组前期研究发现辛热中药挥发油外用给药时，倍半萜类成分相较于其他成分更倾向于滞留在皮内
[9]
，因此本研究同时用
TIGER
数据库筛选在皮肤中表达的蛋白，最后运用
