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李斯特菌极容易污染食品,其中冷藏食品和即食食品危害最为严重,各国均制定了食品中李斯特菌的限量值和监测计划。美国对即食食品中单增李斯特菌的限量规定为0/25g,并要求企业实施GHP和HACCP。中国大陆2013年颁布的《食品中致病菌限量标准GB29921-2013》中规定,在即食肉制品中,单增李斯特菌按照二级采样方法取样不得检出(n=5,c=0,m=0)。
目前,食品微生物检测体系主要包括,中国的国家标准(GB4789)和检验检疫行业标准(SN)、国际化标准化组织(ISO)方法、美国食品药品监督局(FDA)、美国农业部(USDA)、美国官方分析化学师协会(AOAC)、加拿大健康保护部(MFLP)、欧盟食品安全局(EFSA)等检测体系。
食品中单增李斯特菌(Li. monocytogenes)的传统检测方法主要包括增菌、分离和鉴定3 个环节。目前,分离环节常会采用显色培养基,使其菌落颜色不同于其它干扰菌,实现快速分离。鉴定常采用生化反应和血清学反应。目前,生化反应的鉴定技术多采用数值分类鉴定和自动化检测技术。
传统方法检测费时费力操作要求高,因此,李斯特菌快速检测技术和产品的开发是必要的。美国、欧盟等发达国家对微生物快速检测方法的研究和产品认证体系相对成熟,各种不同的快检系统和自动化仪器被推出,并得到广泛的应用。当前,李斯特菌快速检测方法为增菌以后,生化鉴定之前,对样本进行快速筛选,以缩小检测范围,减少检测任务,提高检测效率。快速检测方法主要包括酶底物显色技术、免疫学和分子生物学检测三大类。
即用培养技术:即用培养基技术则省掉了前期准备工作,可以直接检测样品,从而节约了大量人力成本。目前,商业化的固定培养基技术主要有两种:纸片法和即用平皿法。纸片法是指将显色培养基固定于纸片上,上方再盖一层带有方格的透明薄膜,以方便计数。即用平皿法是指用已倒有培养基的平皿,接种操作与传统涂板、划线法一样。其优点和纸片法一样,即省掉了前期准备工作,可以直接接种培养。此类产品主要有3M的Petrifilm试纸片、良润生物的MicroFast®测试片、北京陆桥的Easy test 系列产品及绿洲生化的微生物测试片等,已被许多研究被证明与传统方法的检测结果无显著性差别。