正文
1.1
仪器
Acquity H-Class
型超高效液相色谱仪,美国
Waters
公司,含
Empower 3
工作站;
AE240
型
1/10
万电子天平,梅特勒
-
托利多仪器(上海)有限公司;
LX220ASCS
型
1/1
万电子天平,普利赛斯国际贸易(上海)有限公司;游标卡尺,电子数显卡尺,贵阳西南工具螺纹工具有限公司;
CS-820
分光测色仪,杭州彩谱科技有限公司;
Forma 88000
系列
−
86
℃超低温冰箱,美国
Thermo Scientific
公司;
Rotanta 460R
高速冷冻离心机,德国
Hetich
公司;
KQ-500E
超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司。
1.2
药品与试剂
对照品厚朴酚(批号
KS0912CB14
)、和厚朴酚(批号
T28O6B5149
)、
β-
桉叶醇(批号
P24O8F46474
)均来自上海源叶生物科技有限公司,质量分数均>
98.0%
;枸橼酸莫沙必利(批号
25180402
),鲁南贝特制药有限公司;硫酸阿托品注射液(批号
20180124
),山西省芮城科龙兽药有限公司;植物活性碳粉(批号
124210012
),食品级,生产日期
2018- 06-05
;羧甲基纤维素钠(批号
20120330
),国药集团化学试剂有限公司;氯化钠注射液(批号
A17022005
),河北天成药业股份有限公司;水合氯醛(批号
20130201
),国药集团化学试剂有限公司;水为屈臣氏纯净水;乙腈、甲醇为色谱纯,
Fisher
公司,其他试剂均为分析纯。
1.3
动物
小鼠,昆明品系,雄性,
SPF
级,体质量
20
~
25 g
,购自斯贝福(北京)生物技术有限公司,许可证号:
SCXK
(京)
2016-0002
。饲养于
IVC
笼具(独立通气笼,长×宽×高:
461 mm
×
274 mm
×
229 mm
,意大利
Tecniplast
公司),动物饲养于湿度
(
50
±
5
)
%
、温度(
22
±
2
)℃、
12 h
亮
/12 h
暗循环条件下,每笼
10
只,自由饮食水,适应性饲养
7d
后进行正式实验。所有动物实验遵循中国中医科学院有关实验动物管理和使用的规定,均符合
3R
原则。
1.4
饮片
净厚朴饮片共收集
78
批次(
HPYP01
~
78
),经中国食品药品检定研究院魏锋研究员鉴定,均为木兰科植物厚朴
Magnolia officinalis
Rehd. et Wils.
或凹叶厚朴
M. offcinalis
Rehd. et Wils. var.
biloba
Rehd.et Wils.
的干燥干皮,按《中国药典》
2020
年版一部厚朴饮片标准检验,合格
57
批,作为本次实验用样品。其中
1
~
17
批为药材自采北京华邈药业有限公司代加工饮片,其余
40
批样品购自药材市场,未分等级,详细信息见表
1
。
2
方法与结果
2.1
厚度测定
取每批次厚朴饮片样品约
50g
,采用游标卡尺测量所有饮片两端的厚度,平行测定
3
次,求取本批次所有数据平均值作为该批次样品厚度数据。
2.2
颜色测定
厚朴饮片粉末过
100
目筛,采用高精度台式分光测色仪
CS-820
进行测定,与标准白色(
L
*
97.26
、
a
*
−0.38
、
b
*
+1.22
)做比较,记录样品的
a
*
、
b
*
、
L
*
值,并计算其总色差
[
∆
E
*
ab
,
∆
E
*
ab
=
(∆
L
*2
+
∆
a
*2
+
∆
b
*2
)
1/2
,其中,
∆
L
*
正值表示偏白,
∆
L
*
负值表示偏黑;
∆
a
*
正值表示偏红,
∆
a
*
负值表示偏绿;
∆
b
*
正值表示偏黄,
∆
b
*
负值表示偏蓝
]
值,每份样品粉末重复测定
3
次,求取平均值。结果见表
2
。
2.3
油性成分
β-
桉叶醇含量测定
[8]
精密称取厚朴粉末(过三号筛)约
0.3 g
,加甲醇
25 mL
,冷浸
24 h
,滤过,置
25 mL
量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取滤液用
0.22 μm
微孔滤膜滤过,作为供试品溶液。利用气相色谱法测定
57
份厚朴饮片中
β-
桉叶醇的质量分数,结果见表
2
。
2.4
厚朴酚
、
和厚朴酚和辣薄荷基厚朴酚的含量测定