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脑神秘网络揭开面纱!研究表明:光学显微镜结合深度学习,实现哺乳动物大脑组织的突触级重建!

解螺旋  · 公众号  · 医学  · 2025-05-10 17:30

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研究团队开发了一种基于光学显微镜的连接组学技术(LICONN),通过结合特制的水凝胶嵌入和扩展技术,以及深度学习的分割和连接性分析,成功实现了哺乳动物脑组织的突触级别重建。该技术不仅能够在突触级别上进行神经回路的重建,还能同时获取分子信息,从而为生物实验中的脑组织表型分析提供了一种易于采用的方法。

通过LICONN技术,研究人员能够在光学显微镜下以纳米级分辨率重建脑回路,并结合分子标记进行详细的分子表征。该技术克服了传统光学显微镜在分辨率和对比度上的限制,实现了对神经元细胞结构的高保真追踪和分割,并通过与电子显微镜数据的比较验证了其准确性。这一技术为神经科学研究提供了一种新的工具,能够在不依赖电子显微镜的情况下进行分子信息丰富的脑组织重建。

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临床意义



LICONN技术提供了一种新的、可广泛应用的方法来研究脑组织的连接模式和分子特征。它不仅能在较大的体积内实现高精度的结构和分子信息集成,还能推动对神经疾病机制的深入研究和临床诊断的改进。该技术有潜力在常规神经科学实验室中普及应用,为进一步理解神经网络功能和病理提供了新的视角。

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实验策略



1. 水凝胶嵌入和扩展:  使用含丙烯酰胺(AA)的固定液对小鼠进行心内灌注,使细胞分子具备乙烯基残基,然后与水凝胶共聚合。 通过加入含多功能环氧化合物(如甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和甘油三缩水甘油醚(TGE))的溶液来广泛地功能化蛋白质,为水凝胶锚定做好准备。 聚合可扩展的丙烯酰胺-丙烯酸钠水凝胶,并通过加热和化学变性来破坏机械凝聚力。
2. 免疫标记和蛋白密度染色:  在第一次扩展后进行免疫标记,以可视化特定蛋白质。 使用蛋白密度染色(例如氨基反应性荧光团衍生物)来全面可视化细胞结构。






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