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基因敲除: 我的老鼠只有我懂

解螺旋  · 公众号  · 医学  · 2017-05-21 18:04

正文

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如果是在做动物实验,而且是基因敲除鼠的实验,那么就会做大批量的小鼠基因型鉴定试验,来确定自己小鼠的基因型,然而,再做实验的过程中往往会出现一些意想不到的结果,我作为一只实验狗在这里为大家提一点点小建议。

提取DNA


1、组织提取DNA 剪下老鼠0.5-1.2cm尾巴或者耳朵或者称取20mg组织样本,将样本剪碎放在1.5ml的EP管中。


2、在每个EP管中加入275微升的裂解液(我们实验室使用的是promega的试剂盒)将加入裂解液的组织放在55摄氏度的水浴箱中过夜(16—18h)裂解完全的标志是组织完全溶解。


3、第二天振荡每一个EP管,混匀后再离心,转速13000rmp时间是3分钟,取上清分离毛发,将取的上清加到柱型管中(有滤网的小柱型管,柱型管套装在1.5的EP管中)。







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