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生物学霸  · 公众号  · 生物  · 2025-06-03 17:31

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▼ 附赠《掌握基于细胞的实验》白皮书 ▼


4 大技巧让细胞活力 UP UP



一、优化细胞培养条件


• 根据细胞类型匹配专用培养基,确保培养基营养充足。

• 维持 CO₂ 培养箱 90%~95% 相对湿度,避免低于 90% 导致培养基蒸发。

• 定期清洁培养箱,强化无菌操作,防止细胞污染。



二、细胞复苏、传代与冻存策略


• 复苏时 37 ℃ 水浴快速解冻(< 1 分钟),立即加入 10 倍体积完全培养基稀释 DMSO,1,000 rpm 离心 5 分钟去除冻存液。

• 贴壁细胞待汇合度达 80%~90% 时传代,避免过度融合(> 95%)导致接触抑制。

• 低增殖细胞,传代密度提高至 1 × 10⁵ cells/cm²(高密度促进存活);高增殖细胞(如 HeLa):传代密度控制在 5 × 10⁴ cells/cm²(避免过度拥挤导致接触抑制)。

• 冻存前细胞浓度需达 1~5 × 10⁶ cells/mL,活率 > 95%(活率每降低 10%,复苏后细胞活性下降 30%)。

Note:具体细胞计数及活力检测方法及选择可参考《掌握基于细胞的实验》白皮书,完成上述问卷即可下载查看。







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