还用NCBI传SRA数据呢？落伍了！

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此步骤可填可不填，点击红色按钮，进行下一步，进入页面如下：

最后一步是O verview 阶段，提交确认，这样，B ioproject 就建立了。

返回可以看到， Bioproject 已经成功建立。

第三步，构建 Biosample

先讲一下B iosample 什么概念，比如我们在四个条件下测的转录组，包括：高盐胁迫、干旱胁迫、低温胁迫、重金属胁迫。这样的四个不同的实验称为四个Biosample。

这样的话，我们需要建立四个B iosample ，假如每一个处理下又存在两个重复，这样的话，一个处理需要 建立两个 Biosample .

点击红框的 Biosample ，下一步，进入页面如下：

点击 New Biosample ，下一步，进入页面如下：

点击 Creat Biosample ，下一步，进入页面如下：

同样的，点击红色按钮， 下一步，进入页面如下：

此步骤注意了，要关联 bioproject 的信息，将上一步构建好的 bioproject 号码填写进去。点击的时候，会自动进行关联，直接选择就好了。

点击红色按钮，下一步，进入页面如下：

选择，进行下一步，进入页面如下：

这一步信息填的稍多一些，耐心填完，星号为必填。

最终还是， overview 。

没问题，提交！

返回，会看到， biosample 里面已经建立了序列号。

同样的，为了存储四个条件下的数据，我们建立四个 biosample 。这样的话，在 biosample 菜单下会存在四个序列号。如果每个处理有两个重复的话，会有八个序列号。

第四步，Reads提交

点击红色框，进入下一步

点击红框上传，进入页面如下：

新建GSA，下一步，进入页面如下：

填写信息，自己认识的一个别名，提交，下一步，进入页面如下：

这一步注意了，需要构建Experiment。点击，进行下一步，进入页面如下：

假如这四个处理都是在一个bioproject下进行的，那么其余三次选择左边红色方框的内容时候，都需要选择同一个bioproject。然而，四个实验属于同一个bioproject不属于同一个biosample， 所以之前我们要在同一个bioproject下构建四个biosample，传数据时会对每个sample进行关联。

注意：不同重复需要在同一个Bioproject下建立多个biosample。

提交之后，Experiment就构建好了,确认后返回，页面如下：

下一步就是构建run，按照操作步骤往下走就ok了。

构建run结束了，也就是传数据阶段。

填好，刚才我们例子中提供的文件全名和md5信息。记住，一定要全名，包括后缀gz。

根据下面提供的ftp地址，上传就好了（可以使用FileZilla软件），一定要传到GSA文件夹里面，传完之后，就是等待机器审核了。

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