正文
[18-19]
。在本研究中，拟采用微模塑法制备包载胰岛素的白及多糖可溶性微针柔性贴片（
INS-DMNs
），以白及多糖为针体材料，聚乙烯醇为背衬材料，通过工艺优化，制备具有良好柔韧性背衬与刺入性能的可溶性微针，并考察其理化性能和初步药效学，为白及多糖制备的
DMNs
应用奠定基础。
1
仪器与材料
1.1
仪器
A 25 PDMS
微针模具，台州微芯医药科技有限公司；
DZF-6050
真空干燥箱，上海精宏实验设备有限公司；
SU9010
扫描电子显微镜（
SEM
），日本日立有限公司；
CX21
光学显微镜，日本奥林匹斯有限公司；
VapoMeter
经表皮水分测量仪，芬兰
Delfin
科技有限公司；
TMS-Pro
纹理分析仪，美国
FTC
有限公司；
Brighttime Chirascan
圆二色谱仪，英国
Applied Photophysics
有限公司；
TCS SP8
共聚焦显微镜，德国莱卡公司；
RYJ-6B Franz
扩散池，上海黄药药检有限公司；血糖测量仪，三诺生物传感股份有限公司；
TDL-5A
离心机，中国新宝仪器有限公司；
P10
智能手机，中国华为有限公司。
1.2
药品与试剂
白及药材于
2019
年购自四川省中药饮片有限责任公司，经西南民族大学刘圆教授鉴定为白及
B. striata
(Thund.)Reichb. f.
的干燥块茎。
胰岛素，纯度≥
27 USPunits/mg
，上海麦克林生物科技有限公司，批号
C10432222
；链脲佐霉素（批号
K1922114
）、
FITC
（质量分数＞
90%
，批号
H1816018
），上海阿拉丁生化科技股份有限公司；聚乙烯醇，批号
2016091901
，美国
Sigma-Aldrich
公司；猪胰岛素
ELISA
检测试剂盒，江苏科晶生物科技有限公司，批号
202009
；磷酸盐缓冲液（
PBS
），
pH 7.4
，中国赛默飞世尔科技有限公司；实验用水为去离子水，其他试剂均为分析纯。
1.3
实验动物
雌性
SD
大鼠，
SPF
级，质量（
180
±
20
）
g
，由成都达硕实验动物有限公司提供，合格证号
SCXK
（川）
2019-030
。所有动物实验遵循成都中医药大学动物实验伦理委员会有关实验动物管理和使用的规定，均符合
3R
原则。
2
方法与结果
2.1
白及多糖的制备
根据本课题组先前报道的制备方法获得白及多糖
[13-14]
{Qu, 2016 #21;A, 2019 #17}
。将在
70
℃下烘箱干燥至恒定质量的白及块茎打粉，过
30
目筛。粉末分别用石油醚、乙醇在
70
℃下连续脱脂脱色。将
40
倍体积的去离子水加入预处理的干燥粉末中，
70
℃下搅拌提取
2
次，每次
2 h
，收集清液浓缩至
1/3
体积。浓缩液用
Sevage
试剂处理除去蛋白质。使用乙醇缓慢加入浓缩的脱蛋白质溶液至乙醇体积分数达到
80%
，将其在
4
℃下储藏过夜。最后，沉淀物分别用脱水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，干燥后即得粗多糖。
2.2
总多糖含量的测定
采用硫酸
-
苯酚法对“
2.1
”项下制备的白及多糖中总多糖含量进行测定。以葡萄糖为对照品并绘制标准曲线计算得白及多糖的总多糖质量分数为
64.3%
。
2.3
空白微针的的制备
采用微模塑法制备微针，将提前溶胀好的白及多糖溶液浇铸于
PDMS
模具上，以
3000r/min
离心
30 min
，使白及多糖溶液填充模具腔体并形成针体。去除模具表面多余基质后，加入适量聚乙烯醇溶液形成背衬。将模具置于干燥器内
25
℃干燥
24 h
，即得空白微针。
2.4
微针制备工艺的优化
在实际应用中，
DMNs
的针体需要有足够的机械强度来刺破皮肤实现药物透皮递送，而背衬则需要一定的柔韧性与皮肤紧密贴合。因此，分别对针体和背衬的浓度进行筛选。配制质量分数分别为
10%
、
15%
、
