【GeneThinkTank】肺癌液体活检应用特辑——耐药监测篇

EGFR 激活突变型患者在服用一代EGFR-TKI药物后的一年左右都会发生耐药。研究发现，大约50%的一代EGFR-TKI耐药是由于 EGFR 基因20号外显子出现T790M突变。针对这种耐药机制，三代EGFR-TKI奥西替尼应运而生，并显示出可喜的疗效，然而奥西替尼的耐药同样不可避免。目前，奥西替尼的耐药机制仍知之甚少，本篇研究就利用NGS的检测方法检测了奥西替尼耐药患者血液中的突变情况，并对奥西替尼的耐药机制进行了探讨。

实验设计

第一队列选择7名奥西替尼耐药的患者，取治疗前和进展后的血液进行NGS测序；

第二队列选择15名奥西替尼耐药且EGFR-19DEL或EGFR-L858R阳性患者，对T790M及C797S位点进行数字PCR验证。

研究结果

如图1所示，服用奥西替尼前，患者发现对一代EGFR-TKI耐药，且检测T790M阳性，因此开始服用奥西替尼，六周后，影像学结果表明，患者发生了部分缓解，但是在23周后，患者对奥西替尼耐药，影像学能够看到疾病的进展。通过对患者服用奥西替尼前以及服用奥西替尼进展耐药后的血液进行NGS检测，发现患者进展后产生了一个新的突变，即EGFR-C797S（如图2），初步判断这个突变是奥西替尼的耐药机制之一。

为了进一步验证C797S位点突变是否为奥西替尼的耐药机制，作者将含有常见激活突变19DEL/L858R、一代EGFR-TKI耐药位点T790M以及C797S突变的 EGFR 基因在老鼠的细胞中表达，结果表明：C797S突变能够显著影响细胞对奥西替尼的敏感性，进一步表明C797S是奥西替尼的耐药机制。