正文
、
醋炙延胡索与白芷配伍复方的制备
分别
将延胡索、醋炙延胡索、白芷饮片制成粗粉，再将延胡索、醋炙延胡索分别与
白芷按
3∶1
、
2∶1
、
1
∶
1
进行配伍，得到延胡索
-
白芷（
3
∶
1
）、延胡索
-
白芷（
2∶1
）、延胡索
-
白芷（
1∶1
）、醋炙延胡索
-
白芷（
3∶1
）、醋炙延胡索
-
白芷（
2∶1
）、醋炙延胡索
-
白芷（
1∶1
）共
6
组配伍复方。
2.3
延胡索
、
醋炙延胡索
、
白芷单味药及其配伍复方浸膏的制备
分别精密称取延胡索、醋炙延胡索、白芷及其配伍复方粗粉适量，置于圆底烧瓶中，加入
10
倍量
80%
乙醇回流提取
2 h
，滤过；再加入
10
倍量
80%
乙醇回流提取
1 h
，合并
2
次提取液，离心
15 min
，取上清液，以旋转蒸发仪浓缩至稠膏状，
于水浴上蒸干，分别得到延胡索、醋炙延胡索、白芷及其配伍复方浸膏，每克浸膏分
别相当于
8.423 5 g
延胡索生药、
7.732 0 g
醋炙延胡索、
5.597 0 g
白芷生药、
8.8256 g
延胡索
-
白芷（
1
∶
1
）配伍复方生药、
8.241 8 g
醋炙延胡索
-
白芷（
1∶1
）配伍复方生药、
11.273 2 g
延胡索
-
白芷（
2∶1
）配伍复方生药、
10.714 3 g
醋炙延胡索
-
白芷（
2∶1
）配伍复方生药、
12.442 8 g
延胡索
-
白芷（
3∶1
）配伍复方生药、
12.032 1 g
醋炙延胡索
-
白芷（
3∶1
）配伍复方生药，供镇痛实验用，临用前以蒸馏水配制成混悬液，并稀释至相应浓度
[12]
。
2.4
延胡索
、
醋炙延胡索
、
白芷单味药及其配伍复方中延胡索乙素和欧前胡素的含量测定
[13]
2.4.1
供试品溶液的制备
称取适量延胡索
、
醋炙延胡索
、
白芷单味药及其配伍复方粗粉，按“
2.3
”项下方法制备提取液，滤过，水浴蒸干。残渣以甲醇溶解，定容至
5 mL
量瓶中，经
0.22 μm
滤膜滤过，取续滤液，得到
9
组供试品溶液
[12]
。
2.4.2
对照品溶液的制备
分别精密称取延胡索乙素对照品
3.1 mg
、欧前胡素对照品
4.8 mg
置
10 mL
量瓶中，加甲醇定容至刻度，分别得到延胡索乙素对照品溶液和欧前胡素对照品溶液。另分别精密称取延胡索乙素对照品
15.4 mg
、欧前胡素对照品
10.2 mg
置同一
50 mL
量瓶中，加甲醇定容至刻度，得到延胡索乙素、欧前胡素混合对照品储备液。
2.4.3
色谱条件
色谱柱为
Inertsil
®
ODS-2 C
18
柱
（
250 mm
×
4.6 mm
，
5 μm
），流动相为乙腈（
A
）
-
0.05%
磷酸水溶液（
B
），梯度洗脱：
0
～
8.1 min
，
49.8%
～
60.2% A
；
8.1
～
15.9 min
，
60.2%
～
64.8% A
；
15.9
～
16.0 min
，
64.8%
～
65% A
；
16.0
～
20.0 min
，
65% A
；进样量为
10 μL
；检测波长为
235 nm
；柱温为
35
℃；体积流量为
1.0 mL/min
。如图
1
所示，对照品、供试品溶液中延胡索乙素和欧前胡素能较好地分离，且峰形较好。
2.4.4
线性关系考察
分别精密吸取混合对照品储备液
0.2
、
1.0
、
2.0
、
4.0
、
6.0 mL
置
10 mL
量瓶中，以甲醇定容至刻度，得到一系列对照品溶液，进样分析。分别以延胡索乙素、欧前胡素峰面积为纵坐标（
Y
），进样量为横坐标（
X
），绘制延胡索乙素、欧前
胡素标准曲线，得到回归方程：延胡索乙素为
Y
＝
2
×
10
6
X
＋
9 320.8
、
R
2
＝
0.999 9
，欧前胡素为
Y
＝
4
×
10
6
X
＋
